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應用案例 || 微生物土壤呼吸實(shí)驗室測量方法及數據對比

來(lái)源:北京力高泰科技有限公司 發(fā)布日期:2025-02-13 17:27:03 瀏覽次數:1367

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土壤呼吸,是指土壤中的植物根系、食碎屑動(dòng)物、真菌和細菌等進(jìn)行新陳代謝活動(dòng),消耗有機物,產(chǎn)生二氧化碳的過(guò)程。其中包括土壤中微生物分解有機物的過(guò)程。在這個(gè)過(guò)程中,需氧微生物消耗氧氣,將有機物最終分解為二氧化碳和水。

——土壤微生物有氧呼吸是通過(guò)觀(guān)測O2的消耗和/或CO2的釋放來(lái)測量。

——土壤呼吸強度是評價(jià)土壤微生物總活性的重要指標,也可用于評價(jià)土壤肥力。


土壤呼吸體現了土壤承載包括作物、植物生長(cháng)、土壤動(dòng)物和微生物在內的土壤生命的能力。它是土壤健康的重要指標,體現了生物活性、土壤有機質(zhì)和降解能力。尤其是在分解過(guò)程中,有機質(zhì)所含的有機營(yíng)養物質(zhì)(如有機磷、氮和硫)轉化為可供植物吸收的無(wú)機形式。

在實(shí)驗室中,土壤呼吸被用來(lái)估算土壤微生物生物量。事實(shí)上,土壤呼吸表明土壤維持植物生長(cháng)的能力。由于保護有機質(zhì)的土壤團聚體遭到破壞,土壤通氣性增加,導致耕作后過(guò)度呼吸和有機質(zhì)分解。在缺乏額外投入的情況下,有機質(zhì)減少、土壤聚集減少、植物和微生物可利用的養分有限,會(huì )導致作物減產(chǎn)。在未知碳添加量的情況下,很難預測有機質(zhì)積累和損失的閾值。

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得益于呼吸傳感器,我們可以直接測量土壤微生物呼吸

——測定土壤微生物活性;

——確定添加劑(營(yíng)養物、污染物、土壤改良劑等)對微生物代謝能力的影響;

——確定微生物生物量。


樣品

生物土壤有機調節劑,ID EN99


所需試劑

氫氧化鉀(KOH),用于吸收二氧化碳。


分析儀器

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樣品制備

調整土壤中的水分含量

土壤樣品必須濕度適當,以使微生物得以活化。

?  如果土壤過(guò)干,微生物沒(méi)有活性,土壤微生物轉化過(guò)程停止。

?  如果土壤太濕,缺氧條件下發(fā)生厭氧呼吸,產(chǎn)生難聞的氣味和對植物有害的酸。


檢測土壤水分含量

一個(gè)簡(jiǎn)單方法,用手抓一把土壤,用力握緊,然后松開(kāi)手。

?  如果土壤過(guò)干,就會(huì )散開(kāi),如果正常,就會(huì )保持原來(lái)的形狀。

?  如果土壤過(guò)濕,當緊握時(shí)會(huì )有水分擠出。

根據情況,可以采取必要的措施,如加水或者覆蓋干土。

當土壤濕度調整合適后,需要測定土壤干質(zhì)量分數。


測量土壤體積

在200或250ml量筒中,加入100ml水,再加入50-100g土壤,加入土壤后的總體積減去水的體積就是土壤的體積。


分析過(guò)程

1、分析過(guò)程適宜的溫度是20-25 ℃,我們將培養箱設置為25 ℃。

2、連接Wireless DataBox,并填寫(xiě)RESPIROSoft軟件數據庫。

3、在燒杯中稱(chēng)取50-200克混合均勻的土壤,并將其轉移到1升測試瓶中。

4、在堿容器內添加適量的KOH。

5、將呼吸傳感器安裝在測試瓶上,并擰緊。

6、將測試系統放入已經(jīng)達到設定溫度的培養箱中。

7、等待至少3個(gè)小時(shí),使測量系統達到設定溫度,并產(chǎn)生初始壓力升高的圖形。

  • 初始壓力升高是因為系統的加熱膨脹所致。
  • 可以通過(guò)打開(kāi)測試瓶來(lái)釋放壓力。

8、按下開(kāi)始鍵,持續運行測試至少15天。


測試結果

根據公式計算游離氣體積:

Vfg=Vtot-Vav-Vam-Vsm

Vfg:游離氣體積,單位升;

Vtot:測試容器的總體積,不包括土壤、吸附劑容器和吸附劑的總體積,單位升;

Vav:吸收容器的體積,單位升;

Vam:吸收劑體積,單位升;

Vsm:土壤體積,單位升。


干土質(zhì)量計算

根據公式計算土壤干重:

msd=msm×Wsd

msd:土壤干重,單位千克;

msm:土壤濕重,單位千克;

Wsd:濕土樣品的干質(zhì)量分數。


O2消耗率計算


根據公式計算O2消耗率:

RO2=32000·Vfg·ΔP/t·R·T·msd

RO2:?jiǎn)挝毁|(zhì)量干土壤的氧氣消耗速率,mgO2/g/h;

32000:氧氣的摩爾質(zhì)量,mg/mol;

Vfg:游離氣體積,L;

R:氣體常數,83.14hPaL/mol/K;

T:測量溫度,K;

msd:土壤干重,g;

ΔP:測得的壓力差,hPa

t:測試時(shí)間,h


測試結果

VELP的RESPIROSoft軟件自動(dòng)采集壓力傳感器的壓力值,并以生成圖形顯示,下圖是100g樣品在298K測試的曲線(xiàn)圖。

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注意:當測試系統內壓力下降到800mbar時(shí),瓶?jì)妊鯕庀拇M,需要打開(kāi)測試瓶補充空氣,然后再繼續測試。

以下是對三個(gè)樣品測試的結果。分析時(shí)間20天,選擇這個(gè)時(shí)間是為了監測氧氣消耗隨時(shí)間的變化。

樣品A

稱(chēng)樣量:200g

T=298K

Vfg=0.965L

t=72h

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樣品B

稱(chēng)樣量:200g

T=298K

Vfg=1.037L

t=72h

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樣品C

稱(chēng)樣量:200g

T=298K

Vfg=1.081L

t=72h

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結論

從RSD%值(<3.29%)可以看出,VELP的土壤呼吸傳感器系統是一種可靠的微生物土壤呼吸測定解決方案,這些分析具有出色的重復性。

得益于其創(chuàng )新的無(wú)線(xiàn)技術(shù),傳感器根據設定的數據傳輸頻率,將壓力值實(shí)時(shí)傳輸到無(wú)線(xiàn)數據盒,然后,通過(guò)直觀(guān)的 RESPIROSoftTM界面顯示結果,便于數據管理和結果對比。也可以將呼吸測量傳感器連接到VELP Ermes云平臺,便于遠程查看和監測實(shí)驗過(guò)程。


相關(guān)研究設備

實(shí)驗室土壤呼吸及堆肥測量系統

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